5-CM-H2DCFDA CAS: 1219794-09-8

5-CM-H2DCFDA (5-Chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate) là một hợp chất hóa học được sử dụng rộng rãi như một chất đánh dấu huỳnh quang (fluorescent probe) để phát hiện và đo lường các loại oxy phản ứng (ROS) trong tế bào sống. Công thức phân tử C27H19Cl3O8, khối lượng phân tử 577,79 g/mol. Đây là một dẫn xuất của fluorescein với các nhóm acetate bảo vệ, giúp tăng khả năng thâm nhập tế bào và giữ lại bên trong tế bào nhờ nhóm chloromethyl (CM) có khả năng phản ứng với glutathione và protein nội bào.

Cơ chế hoạt động: 5-CM-H2DCFDA thâm nhập vào tế bào qua màng tế bào dưới dạng không phân cực (do nhóm acetate). Trong tế bào, các esterase nội bào sẽ cắt bỏ các nhóm acetate, tạo ra dạng H2DCFDA không có nhóm acetate (màu xanh). Khi các gốc ROS (như H₂O₂, ·OH, ONOO⁻) có mặt, chúng oxy hóa H2DCFDA thành DCF (dichlorofluorescein) phát huỳnh quang màu xanh lá cây (bước sóng kích thích ~488 nm và phát xạ ~525 nm), tạo ra tín hiệu huỳnh quang có thể đo lường bằng kính hiển vi huỳnh quang, máy đo huỳnh quang hoặc máy flow cytometry.

Ứng dụng: 5-CM-H2DCFDA được sử dụng để đánh giá mức độ stress oxy hóa trong tế bào và mô, nghiên cứu cơ chế bệnh lý của các bệnh thoái hóa thần kinh, tim mạch, ung thư và tiểu đường, và đánh giá tác dụng chống oxy hóa của các hợp chất hoặc chiết xuất thực vật. Nó cũng được sử dụng trong sàng lọc các chất chống oxy hóa và trong các thí nghiệm về chết tế bào và tín hiệu tế bào.

Bảo quản: Bảo quản ở -20°C, tránh ánh sáng và ẩm. Pha chế thành dung dịch gốc (thường trong DMSO) và bảo quản chia nhỏ để tránh đông-tan nhiều lần.