Glutathion disulfua CAS: 27025-41-8

Nghiên cứu này giới thiệu một phương pháp định lượng dựa trên cơ chế tái tạo enzyme (enzymatic recycling assay) đã được đơn giản hóa và loại bỏ các yếu tố gây nhiễu; phương pháp này dựa trên kỹ thuật Tietze để đo tỷ lệ GSH/GSSG trong các thể tích máu rất nhỏ (chỉ từ 10–20 μL), nhờ đó phù hợp với việc lấy máu mao mạch đầu ngón tay mà không cần chọc tĩnh mạch hay sử dụng thiết bị phức tạp. Quy trình này khắc phục hai hạn chế lớn của các phương pháp hiện có: hiện tượng oxy hóa nhân tạo đối với GSH trong quá trình xử lý mẫu (được ngăn chặn bằng cách dẫn xuất hóa ngay lập tức với N-ethylmaleimide - NEM) và yêu cầu về lượng máu lớn hoặc thiết bị đắt tiền. Các tác giả đã đánh giá một cách hệ thống các biến số quan trọng trong giai đoạn tiền phân tích và phân tích—bao gồm việc lựa chọn axit (axit trichloroacetic là tối ưu), chiết xuất NEM dư thừa bằng dung môi hữu cơ (octanol cho thấy mức độ ức chế enzyme thấp nhất), ảnh hưởng của nhiệt độ đến hoạt tính enzyme glutathione reductase, sự nhiễu từ các hợp chất disulfide trong huyết tương và động học phản ứng alkyl hóa của NEM—nhằm đảm bảo độ chính xác và độ tin cậy. Kết quả thẩm định cho thấy hiệu suất thu hồi cao (~98%), độ lệch chuẩn tương đối thấp (<5%) và sự tương đồng cao với phương pháp tham chiếu HPLC (theo phân tích Bland–Altman), với giới hạn định lượng thấp nhất là 75 μM đối với GSH và 0,5 μM đối với GSSG trong máu toàn phần. Phương pháp này cho phép theo dõi tình trạng stress oxy hóa toàn thân một cách đáng tin cậy ngay tại điểm chăm sóc (point-of-care) cũng như theo dõi dọc (longitudinal monitoring) thông qua việc chuẩn hóa kết quả theo nồng độ hemoglobin.